透析 dialysis
定義:依據(jù)濃度梯度的差別將分子量低的分子或離子通過(guò)透析膜從溶液中去除的操作。
學(xué)科:化學(xué)_分析化學(xué)_化學(xué)分析
相關(guān)名詞:透析膜 透析液 微透析
【延伸閱讀】
透析是把待分離或純化的樣品封入由半透膜(透析膜)構(gòu)成的袋子(透析袋)內(nèi),然后將袋子放入低離子強(qiáng)度的液體(透析液)中進(jìn)行滲透。整個(gè)滲透過(guò)程既有溶劑流動(dòng),又有溶質(zhì)流動(dòng)。透析膜根據(jù)需要有不同的規(guī)格,使得膜內(nèi)分子量小于某一分子量的分子才能透過(guò)膜進(jìn)入透析液中,從而實(shí)現(xiàn)大分子與小分子的分離或生物大分子的純化。
為了加速透析進(jìn)程,一般透析過(guò)程中要連續(xù)攪拌,同時(shí)在透析袋內(nèi)留下大約總體積10%的空隙,以便使透析膜界面兩側(cè)能透過(guò)膜的分子濃度梯度加大。當(dāng)兩側(cè)濃度相當(dāng)時(shí),透析便達(dá)到平衡。如要進(jìn)一步透析,則需更換透析液。勤換透析液或使用較大量的透析液都能加快透析進(jìn)程。
常用的透析膜材料有火棉膠、玻璃紙以及纖維素等。膜孔徑的大小可以有不同規(guī)格,在醫(yī)藥工業(yè)中常使用纖維素透析管。透析管的選擇主要考慮分子量阻截范圍,其次考慮管的尺寸(一般以管的直徑表示)。透析管使用之前一般要進(jìn)行適當(dāng)處理,以除去甘油、重金屬離子、含硫污染物及可能存在的蛋白或核酸水解酶類(lèi)等。
最常見(jiàn)的透析液是水,在純水中透析一般速度較快,但有可能造成生物物質(zhì)活性喪失。通常選擇具有一定pH和離子強(qiáng)度的緩沖液作為透析液,有時(shí)也選擇高分子惰性物質(zhì)的濃溶液。高分子不會(huì)進(jìn)入膜內(nèi),而水分子可以從膜孔自由出入。這種情況下,除了正常透析之外,由于膜內(nèi)外存在滲透壓差,膜內(nèi)更多的水會(huì)透析到膜外,直到內(nèi)外滲透壓達(dá)到平衡為止,因而也具有濃縮樣品的功能。
例如在分離及純化蛋白質(zhì)和酶時(shí),經(jīng)常要加入有機(jī)溶劑或無(wú)機(jī)鹽類(lèi)(如硫酸銨或硫酸鈉)以沉淀蛋白質(zhì)類(lèi)生物大分子。生物大分子沉淀時(shí)不可避免地混雜有一些小分子,從而干擾生物大分子的進(jìn)一步純化或性質(zhì)鑒定。透析法是除去這些小分子的簡(jiǎn)便而有效的方法。如果去除小分子的同時(shí)還需要使樣品濃縮,則選擇濃的惰性高分子溶液作為透析液。
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